TSKgel HILIC Columns for Polar Analytes

La cromatografía líquida de fase normal y de interacción hidrofílica (HILIC) se utilizan principalmente para separar compuestos polares e hidrofílicos. En el modo de fase inversa, los compuestos muy polares no suelen quedar suficientemente retenidos en una fase móvil con bajo porcentaje orgánico, o incluso en una fase móvil 100% acuosa. El orden de elución en fase normal es opuesto al encontrado en fase reversa para la misma mezcla de compuestos. Aunque tradicionalmente en la LC de fase normal se utilizaban fases móviles orgánicas no polares y una fase estacionaria de sílice, hoy en día la mayoría de las separaciones se realizan con fases móviles orgánicas acuosas y una fase estacionaria más polar. Este modo de HPLC se conoce comúnmente como HILIC, cromatografía líquida de interacción hidrofílica.

Mediante el uso de una columna de fase amida o amino enlazada, los compuestos polares pueden ser retenidos por un mecanismo de retención de fase normal o de cromatografía de interacción hidrofílica. Las fases móviles típicas en HILIC son tampones acuosos con modificadores orgánicos, principalmente acetonitrilo. A diferencia del comportamiento de retención en fase inversa, en HILIC los solutos se retienen durante más tiempo al aumentar el porcentaje de acetonitrilo.

Las aplicaciones típicas de HILIC son:

• Análisis de polioles, carbohidratos o vitaminas
• Caracterización de la glicosilación de proteínas mediante detección por fluorescencia o espectrometría de masas
• Separación de péptidos polares, por ejemplo tras la digestión enzimática de proteínas (mapeo de péptidos)
• Análisis de fármacos polares y separación de metabolitos de fármacos
• Análisis LC/MS de compuestos polares

Detalles del producto:

Las fases estacionarias TSKgel de fase normal/HILIC son materiales de relleno a base de sílice uniformemente unida con distribuciones de tamaño de poro estrechas y tamaños de partícula bien definidos para garantizar un alto rendimiento. Las columnas TSKgel HILIC están disponibles con fases carbamoil y amino enlazadas covalentemente y ambas fases son estables en eluyentes 100% orgánicos.

Columna TSKgel Amide-80:

Las columnas TSKgel Amide-80 están empaquetadas con partículas esféricas de sílice de 2, 3, 5 o 10 µm que están unidas covalentemente con grupos carbamoilo. Las columnas TSKgel Amide-80 poseen una estabilidad superior en sistemas de disolventes acuosos/orgánicos. Además, es ideal para el análisis LC/MS sensible de compuestos polares solubles en agua, ya que el alto contenido orgánico en la fase móvil proporciona una rápida evaporación del disolvente durante la ionización por electrospray. También está disponible dentro de esta línea una columna TSKgel Amide-80 HR que ofrece altas especificaciones para el recuento de placas (N = >18.000).

Columna TSKgel NH2-100:

Las columnas amidas TSKgel NH2-100 destacan por ofrecer una estabilidad química muy mejorada, requisito indispensable para conseguir resultados reproducibles y fiables. Estas columnas son únicas en el sentido de que el ligando de fase enlazada no sólo tiene un grupo amino primario terminal, como era de esperar, sino que el espaciador también incorpora grupos amino secundarios y terciarios. Los compuestos aniónicos quedan retenidos en la columna por interacción iónica. Esto permite el uso de gradientes en la concentración de sal además de eluciones gradientes con acetonitrilo.